期刊简介
主要报道和刊登国内外、特别是我国消化病学者具有创造性的、有较高学术水平的基础和临床研究论文、研究快报等. 对具有中国特色的研究论文, 如食管癌、胃癌、肝癌、大肠癌、病毒性肝炎、幽门螺杆菌、中医中药、中西医结合和基于作者自己研究工作为主的综述性论文, 将优先发表. 读者对象为基础研究或临床研究的消化专业工作者。
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首页>世界华人消化杂志
- 杂志名称：世界华人消化杂志
- 主管单位：华人消化杂志；新消化病学杂志
- 主办单位：山西省科学技术厅
- 国际刊号：14-1260/R
- 国内刊号：14-1260/R
- 出版周期：旬刊
期刊荣誉：国家期刊奖百种重点期刊（第二和第三届）期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, 维普收录(中), 医学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中)
DR-nm23基因慢病毒表达载体的构建及其在人结直肠癌SW620细胞中的表达
曲利娟；苏娟娟；梁莉
关键词：结直肠癌, SW620细胞系, DR-nm23基因, 慢病毒载体, 基因转染
摘要：目的:构建DR-nm23基因慢病毒表达载体及建立DR-nm23基因稳定表达的人结直肠癌SW620细胞系,为DR-nm23基因功能研究奠定基础,方法:应用逆转录聚合酶链反应方法筛选无内源性DR-nm23基因表达的人结直肠癌细胞系.通过AgeⅠ酶切获得DR-nm23 eDNA片段,并将其交换连接到慢病毒表达载体pGC-FU中.慢病毒表达质粒pGC-FU-DR-nm23-GFP和包装质粒共转染293T细胞,孔稀释法测定慢病毒滴度.获得重组的慢病毒,感染人结直肠癌SW620细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白及Western blot检测DR-nm23在SW620细胞中的表达,结果:低转移性结直肠癌SW480、HT29细胞DR-nm23基因高表达,而高转移性SW620细胞不表达.重组慢病毒质粒pGC-FU-DR-nm23-GFP酶切鉴定结果与目的基因条带吻合克隆测序结果与NCBI收录的DR-nm23基因序列(NM_002510)完全一致.重组慢病毒质粒可高效转染293T细胞,慢病毒滴度为2E+9 TU/mL.收集慢病毒上清液感染SW620细胞,荧光显微镜下观察85％细胞表达绿色荧光.感染后SW620细胞DR-nm23稳定高表达.结论:成功构建了携带DR-nm23与GFP融合基因的慢病毒表达载体pGC-FU-DR-nm23-GFP,获得了DR-nm23基因稳定表达的结直肠癌SW620细胞系.该细胞系可作为研究DR-nm23基因功能研究的可靠细胞模型.
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