期刊简介

主要报道和刊登国内外、特别是我国消化病学者具有创造性的、有较高学术水平的基础和临床研究论文、研究快报等. 对具有中国特色的研究论文, 如食管癌、胃癌、肝癌、大肠癌、病毒性肝炎、幽门螺杆菌、中医中药、中西医结合和基于作者自己研究工作为主的综述性论文, 将优先发表. 读者对象为基础研究或临床研究的消化专业工作者。

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  • 杂志名称:世界华人消化杂志
  • 主管单位:华人消化杂志;新消化病学杂志
  • 主办单位:山西省科学技术厅
  • 国际刊号:14-1260/R
  • 国内刊号:14-1260/R
  • 出版周期:旬刊
期刊荣誉:国家期刊奖百种重点期刊(第二和第三届)期刊收录:上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, 维普收录(中), 医学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中)
世界华人消化杂志2006年第06期

小鼠甲胎蛋白基因的克隆表达鉴定及稳定表达甲胎蛋白的小鼠肿瘤细胞株的建立

田耕;易继林;刘积良;翁准

关键词:甲胎蛋白, 小鼠, 真核表达载体, 细胞株
摘要:目的:克隆小鼠甲胎蛋白(AFP)基因并进行表达鉴定,构建小鼠AFP真核表达载体并建立稳定表达甲胎蛋白的小鼠肿瘤细胞株.方法:从Hepa1-6细胞中提取总RNA进行RT-PCR,克隆出小鼠AFP基因,亚克隆于pcDNA3.1中构建真核表达载体pmAFP,进行酶切、测序和表达鉴定,pmAFP稳定转染EL-4细胞建立EL-4(mAFP)细胞株,RT-PCR检测EL-4(mAFP)细胞mAFP mRNA的表达,Western blot检测mAFP蛋白表达,将EL-4(mAFP)细胞种植于6只小鼠背部皮下观察成瘤情况.结果:RT-PCR成功克隆出小鼠AFP基因,酶切、测序和表达鉴定证实真核表达载体pmAFP构建成功,RT-PCR及Western blot检测证实EL-4(mAFP)细胞中有mAFP mRNA及蛋白的表达,5只小鼠背部皮下种植处有肿瘤形成,22 d肿瘤体积为2 279.97±235.13 mm3.结论:小鼠mAFP基因克隆成功,真核表达载体构建成功,建立的EL-4(mAFP)细胞株能有效表达小鼠甲胎蛋白,在小鼠体内成瘤性良好.