期刊简介
主要报道和刊登国内外、特别是我国消化病学者具有创造性的、有较高学术水平的基础和临床研究论文、研究快报等. 对具有中国特色的研究论文, 如食管癌、胃癌、肝癌、大肠癌、病毒性肝炎、幽门螺杆菌、中医中药、中西医结合和基于作者自己研究工作为主的综述性论文, 将优先发表. 读者对象为基础研究或临床研究的消化专业工作者。
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首页>世界华人消化杂志
- 杂志名称：世界华人消化杂志
- 主管单位：华人消化杂志；新消化病学杂志
- 主办单位：山西省科学技术厅
- 国际刊号：14-1260/R
- 国内刊号：14-1260/R
- 出版周期：旬刊
期刊荣誉：国家期刊奖百种重点期刊（第二和第三届）期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, 维普收录(中), 医学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中)
胃癌相关基因GCRG213正反义真核表达载体的构建及鉴定
高利利；吴本俨；王孟薇；黄海力；伍银桥；尤纬缔；王卫华
关键词：胃癌相关基因GCRG213, 真核表达, 胃癌细胞, 基因转染
摘要：目的:构建胃癌相关基因GCRG213正、反义真核表达载体.方法:从pGEM-T质粒上扩增出的胃癌相关基因GCRG213的DNA片段,两端分别引入限制性内切酶KpnI,BamHI和EcoRI,BamHI识别位点,按正向、反向克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+).测序正确的重组子pcDNA3.1-a(含GCRG213正向克隆),pcDNA3.1-b(含GCRG213反向克隆)和空载体经脂质体转染人胃癌细胞系MKN45细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞株,采用半定量RT-PCR及Western blot比较转染不同质粒的MKN45细胞中GCRG213在mRNA和蛋白质水平上的表达差异.结果:经测序证实,GCRG213正向克隆和反向克隆正确插入真核表达载体pcDNA3.1(+),组成重组子pcDNA3.1-a(含正向克隆),pcDNA3.1-b(含反向克隆).重组子pcDNA3.1-a,pcDNA3.1-b和空载体经脂质体转染人胃癌细胞系MKN45细胞,G418筛选获得稳定转染的细胞株.与对应的空载体比较,RT-PCR结果显示转染pcDNA3.1-a的MKN45细胞中其mRNA的表达上调35.4%,而转染pcDNA3.1-b的MKN45细胞中其mRNA的表达下调32.1%;Western blot结果显示转染pcDNA3.1-a的MKN45细胞中其蛋白的表达上调49.4%,而转染pcDNA3.1-b的MKN45细胞中其蛋白的表达下调50.3%.结论:成功构建胃癌相关基因GCRG213正、反义真核表达载体.
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