期刊简介
主要报道和刊登国内外、特别是我国消化病学者具有创造性的、有较高学术水平的基础和临床研究论文、研究快报等. 对具有中国特色的研究论文, 如食管癌、胃癌、肝癌、大肠癌、病毒性肝炎、幽门螺杆菌、中医中药、中西医结合和基于作者自己研究工作为主的综述性论文, 将优先发表. 读者对象为基础研究或临床研究的消化专业工作者。
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首页>世界华人消化杂志
- 杂志名称：世界华人消化杂志
- 主管单位：华人消化杂志；新消化病学杂志
- 主办单位：山西省科学技术厅
- 国际刊号：14-1260/R
- 国内刊号：14-1260/R
- 出版周期：旬刊
期刊荣誉：国家期刊奖百种重点期刊（第二和第三届）期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, 维普收录(中), 医学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中)
幽门螺杆菌重组VacA-HpaA IgY的制备
叶翠莲；杨致邦；黄伟；毛小琴；张绍兰；黄进
关键词：幽门螺杆菌, 重组蛋白, 细胞空泡毒素抗原, 黏附素, 蛋黄抗体
摘要：目的:采用基因工程技术大量表达、提纯幽门螺杆菌(H pylori)细胞空泡毒素毒性片段,和黏附素片段的融合蛋白,以此为抗原,制备高效价的抗VacA-HpaA蛋黄抗体(IgY).方法:大量培养重组菌pQE30-VacA-HpaA-DH5α,诱导表达获得融合蛋白VacA-HpaA,Ni2+-NTA树脂纯化.将纯化的重组蛋白免疫鸡,水稀释法提取IgY,硫酸铵沉淀法纯化浓缩VacA-HpaA IgY.ELISA法测定抗体产生的时间-效价变化,SDS-PAGE分析纯度,Bradford法测定蛋白含量,Western blot检测其分别对VacA和HpaA抗原的特异性,ELISA法检测效价.结果:重组蛋白主要以包涵体形式表达,免疫鸡后提取的IgY可与该蛋白发生免疫反应,IgY效价总体上随免疫时间增加而升高.经纯化、浓缩后,获得纯度为60%左右,效价为1:12 800的VacA-HpaA IgY,蛋白浓度为22 g/L,Western blot显示在Mr27 000和Mr30 000处分别有相应条带,ELISA检测与VacA和HpaA反应的效价分别为1∶3200和1∶6400(P＜0.01).结论:成功制备了高浓度、高效价的抗重组VacA-HpaA的特异性IgY.
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