期刊简介
主要报道和刊登国内外、特别是我国消化病学者具有创造性的、有较高学术水平的基础和临床研究论文、研究快报等. 对具有中国特色的研究论文, 如食管癌、胃癌、肝癌、大肠癌、病毒性肝炎、幽门螺杆菌、中医中药、中西医结合和基于作者自己研究工作为主的综述性论文, 将优先发表. 读者对象为基础研究或临床研究的消化专业工作者。
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首页>世界华人消化杂志
- 杂志名称：世界华人消化杂志
- 主管单位：华人消化杂志；新消化病学杂志
- 主办单位：山西省科学技术厅
- 国际刊号：14-1260/R
- 国内刊号：14-1260/R
- 出版周期：旬刊
期刊荣誉：国家期刊奖百种重点期刊（第二和第三届）期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, 维普收录(中), 医学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中)
胃肠道平滑肌细胞作为eNOS基因转移靶细胞的研究
宁守斌；张忠兵；沈茜；谢渭芬；杨秀疆；赵新；信栓力
关键词：胃肠道, 平滑肌细胞, 基因转移, 靶细胞, Transfer of, 活性比, 病毒表达载体, 重组腺病毒, 感染细胞, 钙离子, 一氧化氮合酶, 体外培养, 精氨酸, 构建, 稳定表达, 离子浓度, 技术检测, 合成, 高效表达, 抑制剂
摘要：目的:构建内皮型一氧化氮合酶(eNOS)腺病毒表达载体,介导eNOS在胃肠道平滑肌细胞中稳定表达并评价表达产物eNOS的酶学活性.方法:构建牛eNOS的重组腺病毒表达载体Ad-eNOS,感染体外培养的猫下段食管及胃底部平滑肌细胞,采用Western blot、RT-PCR技术检测eNOS在平滑肌细胞中的表达,测定基因转移后NOS活性以及一氧化氮(NO)产量,并研究不同施加因素对NOS活性及NO合成的影响.结果:Ad-eNOS可高效感染体外培养的胃肠平滑肌细胞(MOI=50,感染效率=74%),Western blot、RT-PCR结果证实eNOS在平滑肌细胞中高效表达.Ad-eNOS感染细胞后基础NOS活性比感染前显著增高(93±13 vs 47±13 nkat/L,P＜0.05),培养液中累积的NO增加了3倍(45±13 vs16±7μmol/L,P＜0.05).分别加入L-精氨酸(10-4mol/L)、钙离子(10-4 mol/L)、EGTA(钙离子螯合剂,10-4 mol/L)及L-NAME(NOS抑制剂,10-3mol/L)后,NOS活性分别为94±8,173±25,29±6,58±11 nka/L,NO含量分别为48±14,106±18,6±2,17±11 μmol/L.结论:构建的重组腺病毒Ad-eNOS能够高效介导eNOS基因在消化道平滑肌细胞中表达,表达产物eNOS活性受钙离子浓度调节,其作用底物L-精氨酸并不是NO合成的限速步骤.
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