期刊简介

主要报道和刊登国内外、特别是我国消化病学者具有创造性的、有较高学术水平的基础和临床研究论文、研究快报等. 对具有中国特色的研究论文, 如食管癌、胃癌、肝癌、大肠癌、病毒性肝炎、幽门螺杆菌、中医中药、中西医结合和基于作者自己研究工作为主的综述性论文, 将优先发表. 读者对象为基础研究或临床研究的消化专业工作者。

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  • 杂志名称:世界华人消化杂志
  • 主管单位:华人消化杂志;新消化病学杂志
  • 主办单位:山西省科学技术厅
  • 国际刊号:14-1260/R
  • 国内刊号:14-1260/R
  • 出版周期:旬刊
期刊荣誉:国家期刊奖百种重点期刊(第二和第三届)期刊收录:上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, 维普收录(中), 医学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中)
世界华人消化杂志2001年第06期

HCV C基因腺病毒表达载体骨架质粒pAd.HCV-C的构建、鉴定及表达

郝春秋;周永兴;冯志华;李谨革;贾战生;王平忠

关键词:C型肝炎样病毒属/遗传学, 基因, 病毒, 腺病毒科/遗传学, 遗传载体, 质粒, 重组, 遗传
摘要:目的构建能表达HCV C基因的腺病毒表达载体的重组骨架质粒,为进一步包装能高效表达HCV C基因的腺病毒载体做准备.方法用分别含有BglⅡ及HindⅢ酶切位点的HCV C区基因上、下游引物,以含有HCV H株基因序列的质粒pBRTM/HCV1-3011为模板,通过PCR扩增获得HCV C区基因片段,基因片段回收后,以BglⅡ及HindⅢ双酶切,定向插入到腺病毒骨架质粒pAd.CMV-Link.1中CMV启动子下游BglⅡ与HindⅢ位点之间,获得重组表达质粒pAd.HCV-C.通过BglⅡ/HindⅢ双酶切、PCR及插入片段序列测定对质粒进行了鉴定.以抗HCV C单克隆抗体为一抗,利用间接免疫荧光法检测了pAd.HCV-C在人肝癌细胞7721中的瞬时表达.结果酶切、PCR及测序鉴定证实,pAd.HCV-C插入片段为HCV C区基因片段,免疫荧光法检测表明其可以在7721细胞中瞬时表达.结论构建的质粒pAd.HCV-C可以在7721细胞中瞬时表达HCV C区基因,为包装表达HCV C基因的腺病毒载体奠定了基础.