期刊简介
主要报道和刊登国内外、特别是我国消化病学者具有创造性的、有较高学术水平的基础和临床研究论文、研究快报等. 对具有中国特色的研究论文, 如食管癌、胃癌、肝癌、大肠癌、病毒性肝炎、幽门螺杆菌、中医中药、中西医结合和基于作者自己研究工作为主的综述性论文, 将优先发表. 读者对象为基础研究或临床研究的消化专业工作者。
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首页>世界华人消化杂志
- 杂志名称：世界华人消化杂志
- 主管单位：华人消化杂志；新消化病学杂志
- 主办单位：山西省科学技术厅
- 国际刊号：14-1260/R
- 国内刊号：14-1260/R
- 出版周期：旬刊
期刊荣誉：国家期刊奖百种重点期刊（第二和第三届）期刊收录：上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 文摘与引文数据库, 维普收录(中), 医学文摘, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 万方收录(中)
GCDC诱发体外培养大鼠肝细胞凋亡的实验研究
王剑明；邹声泉
关键词：甘氨鹅脱氧胆酸钠, 肝细胞, 细胞凋亡
摘要：在阻塞性黄疸中因胆汁瘀积引起胆盐的升高,进而导致肝损害,但其损害机制尚未阐明.阻塞性黄疸(阻黄)时胆盐对肝细胞凋亡的影响知之甚少.我们用DNA含量流式细胞术.(FCM)和末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)研究不同浓度的甘氨鹅脱氧胆酸钠.(GCDC)对体外培养大鼠肝细胞凋亡状态的影响,以探讨阻黄肝损害的病理机制.1材料和方法1.1材料①肝细胞的分离与培养:采用胶原酶原位肝灌注法.健康♂Wistar大鼠,氯胺酮0.2 mg/kg ip,麻醉后固定体位,消毒皮肤后进腹,显露游离门静脉后距肝门2 cm处插入18号导管,用D-Hanks液(含0.1 g/L EDTA,pH 7.4,37℃)以25 mL/min灌入,然后于肝下后腔静脉插入16号导管放出积血积液;门静脉改用0.5 g/L IV型胶原酶及0.1 g/L DNase IHanks液持续灌注5min,取下肝脏,置入含4℃Hanks液的平皿中,剪去肝被膜,加2.5 g/L胰蛋白酶继续消化20min,Hanks液终止,100目尼龙网过滤,加RPMI 1640 50mL,制成混合肝细胞悬液,置入37℃恒温水浴中孵化10min,过滤,离心,去上清,4℃hanks液重悬用40 g/L盼蓝染色判断肝细胞活率,用细胞计数板记数细胞浓度.细胞培养于合成培养基(含RPMI 164080 mL,新生小牛血清20 mL、青霉素100 kU/L,链霉素100 g/L,胰岛素0.1 kU/L,以及hepes 15mmol)培养条件37℃,50 mL/L CO2②主要试剂:IV型胶原酶、DNaseI、胰蛋白酶、甘氨鹅脱氧胆酸钠(GCDC)、碘化丙锭(PI)染色剂为Sigma公司产品;细胞凋亡原位检测试剂盒(TUNEL)为德国宝灵曼公司提供.
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